在微生物工作中，菌種的接種移植是一項主要操作，這項操作的特點就是要保證菌種純種，防止雜菌的污染。在一般環境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對接種工作干擾很大。而無菌室的(de)存在對于菌種(zhong)的(de)保護起到(dao)了很好的(de)作(zuo)用(yong)，減(jian)少了污染情(qing)況，所(suo)以無(wu)菌室也稱接(jie)種(zhong)室，是系(xi)統(tong)接(jie)種(zhong)、純(chun)化菌種(zhong)等無(wu)菌操作(zuo)的(de)專用(yong)實(shi)驗室。

一、無菌實驗室裝修設計細節

根據經濟和科學的角度來講，無菌實驗室裝修的基本要求如下：

（1）門(men)應設(she)在離工作臺(tai)最遠的位置上，內(nei)間(jian)應當設(she)拉門(men)，以減少空氣的波動；外間(jian)的門(men)最好也(ye)用拉門(men)，要設(she)在距內(nei)間(jian)最遠的位置上。

（2）無菌實驗室設計應有內(nei)、外兩間(jian)，內(nei)間(jian)是無(wu)菌(jun)室(shi)，外間(jian)是緩沖室(shi)。房間(jian)容積不宜過大(da)，以便于空(kong)氣(qi)滅菌(jun)。內(nei)間(jian)面(mian)積2×2.5＝5m2，外間(jian)面(mian)積1×2＝2m2，

高以(yi)2.5m以(yi)下(xia)為宜，都應有天花板。

（3）無菌(jun)實驗室容積小而嚴(yan)密，使用(yong)一段(duan)時間(jian)后，室內(nei)溫度(du)很高，故(gu)應設(she)(she)置通(tong)氣窗(chuang)。通(tong)氣窗(chuang)應設(she)(she)在內(nei)室進門處的(de)(de)頂棚(peng)上（即離工作臺(tai)最遠的(de)(de)位置），最好為雙(shuang)層結構，外層為百(bai)葉(xie)窗(chuang)，內(nei)層可用(yong)抽板(ban)式窗(chuang)扇。通(tong)氣窗(chuang)可在內(nei)飾使用(yong)后、滅菌(jun)前開啟(qi)，以流通(tong)空(kong)氣。有條件可安(an)裝恒溫恒濕機。

（4）在分隔內(nei)間與外(wai)(wai)間的墻壁或(huo)“隔扇(shan)”上，應開一(yi)個小(xiao)(xiao)窗，作接種過程中必要的內(nei)外(wai)(wai)傳遞物品的通道，以(yi)減(jian)少人員進出內(nei)間的次數，降低污染程度。小(xiao)(xiao)窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內(nei)外(wai)(wai)都掛對拉的窗扇(shan)。

二、無菌實驗室實驗操作注意事項

1．實(shi)驗(yan)進行前，無(wu)菌(jun)室及無(wu)菌(jun)操作(zuo)臺(tai)以紫外燈(deng)照(zhao)射30-60分鐘(zhong)滅(mie)菌(jun)，以70%的酒精(jing)擦拭(shi)無(wu)菌(jun)操作(zuo)抬面，并開(kai)啟(qi)無(wu)菌(jun)操作(zuo)臺(tai)風扇運轉(zhuan)10分鐘(zhong)后(hou)，才開(kai)始實(shi)驗(yan)操作(zuo)。

2．小(xiao)心取用無菌之實驗物(wu)品，避免造成污染。勿(wu)碰觸吸管(guan)尖頭部或是容(rong)器瓶(ping)口，亦不要在打開之容(rong)器正上方操作實驗。容(rong)器打開后，以手夾住(zhu)(zhu)瓶(ping)蓋并握住(zhu)(zhu)瓶(ping)身，傾斜約(yue)45°角取用，盡量勿(wu)將瓶(ping)蓋蓋口朝上放(fang)置桌面。

3．工(gong)作人員應注意自身之(zhi)安全，須穿戴實(shi)驗衣及手套后才進行實(shi)驗。對于來自人類(lei)或(huo)是病毒感染之(zhi)細胞株應特別小心操(cao)作，并(bing)選擇適當等(deng)級之(zhi)無菌操(cao)作臺(至少ClassII)。操(cao)作過(guo)程中，應避(bi)免引起氣溶(rong)膠類(lei)物(wu)質(zhi)的產(chan)生，小心毒性藥品，例如(ru)DMSO及TPA等(deng)，并(bing)避(bi)免尖(jian)銳針頭之(zhi)傷害等(deng)。

4．接(jie)種(zhong)針(zhen)每次使用前后，必(bi)須通過火焰灼燒(shao)滅菌，待冷卻后，方可接(jie)種(zhong)培養物。

5．無菌操作工作區域應(ying)保持清(qing)潔及寬敞(chang)，必要物(wu)品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒(he)等可以暫時放置，其它實(shi)驗(yan)用品用完即應(ying)移出，以利于氣(qi)流之流通。實(shi)驗(yan)用品以70%的酒精擦拭后(hou)才(cai)帶(dai)入無菌操作臺(tai)內。實(shi)驗(yan)操作應(ying)在(zai)抬面(mian)之中央無菌區域，勿在(zai)邊緣的非無菌區域操作。

6．使用無(wu)(wu)菌瓶(ping)內的溶液(ye)是，不可將無(wu)(wu)菌敷(fu)料(liao)堵塞瓶(ping)口傾倒無(wu)(wu)菌溶液(ye)，或直接伸入溶液(ye)瓶(ping)內蘸(zhan)取，以(yi)免污(wu)染剩余(yu)的溶液(ye)。

7．每(mei)次操作過程中(zhong)，均應做陰性對照，以檢查無菌操作的可(ke)靠性。

8．如有菌(jun)液灑在桌上(shang)(shang)或(huo)地上(shang)(shang)，應(ying)立即(ji)(ji)用(yong)5%石碳酸溶液或(huo)3％的來蘇爾傾覆在被污(wu)染處至少30分(fen)鐘，再做處理。工作衣帽等(deng)受到菌(jun)液污(wu)染時，應(ying)立即(ji)(ji)脫去，高壓蒸汽滅菌(jun)后洗(xi)滌。

9．無菌(jun)(jun)包(bao)內物(wu)品不(bu)慎(shen)污染或無菌(jun)(jun)包(bao)浸濕，外界微生物(wu)可滲入(ru)包(bao)內，造成污染，需重新消毒。

10．凡帶有活菌的物(wu)品，必須經消毒后(hou)，才能在(zai)水龍頭下(xia)沖洗(xi)，嚴禁污染下(xia)水道。

11．吸(xi)(xi)取(qu)菌液時(shi)，必須用吸(xi)(xi)耳球(qiu)吸(xi)(xi)取(qu)，切勿直(zhi)接用口(kou)接觸吸(xi)(xi)管。

12．帶有菌液的(de)吸管(guan)，試管(guan)，培(pei)養(yang)皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇(su)爾(er)溶液的(de)消(xiao)毒(du)桶內消(xiao)毒(du)，24小(xiao)時后取(qu)出沖洗。

13．戴手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)時應注意未戴手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)的手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)不可(ke)觸(chu)及手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)外(wai)面(mian)，而(er)戴手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)的手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)則不可(ke)觸(chu)及未戴手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)的手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)或另一手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)的里(li)面(mian)。戴手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)后如(ru)發現破裂，應立(li)即(ji)更(geng)換。脫(tuo)手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)時，須將手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)口翻轉膠下，不可(ke)用(yong)力強拉(la)手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)套(tao)(tao)(tao)(tao)邊緣或手(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)(shou)指部分，以(yi)免損(sun)壞(huai)。

14．實(shi)驗(yan)(yan)完畢后，將實(shi)驗(yan)(yan)物品帶出工作臺(tai)，以70%的酒精擦拭(shi)無菌(jun)操作抬面(mian)。操作間隔應讓無菌(jun)操作臺(tai)運轉(zhuan)10分鐘以上后。