無菌室是微生物檢測的重要場所與基本的設施。它是微生物檢測質量保證的重要物質基礎。因此它的設計要按國家標準-2001《潔凈廠房設計規范》、國家藥品監督管理局頒發的《藥品檢驗所實驗室質量管理規范（試行）》中第十八條規定執行。微生物實驗室無菌室的施工、安裝、驗收應按國家行業標準JGJ71-1990《無菌室的施工及驗收規范》執行。對于微生物檢測工作者和使用管理者來講，更大量的工作是進行正常管理到日常的使用。無菌室的標準要符合GMP潔凈度標準要求。
無菌室的要求標準
1.無菌室要符合(he)規(gui)范(fan)要求(qiu)：無菌室應(ying)采光(guang)良好、避免潮濕、遠(yuan)離廁所及污染區。面(mian)積一般(ban)不(bu)(bu)(bu)(bu)超(chao)過10m2，不(bu)(bu)(bu)(bu)小于5m2；高度不(bu)(bu)(bu)(bu)超(chao)過2.4m。由1—2個緩(huan)沖(chong)間(jian)、操(cao)作(zuo)間(jian)組成（操(cao)作(zuo)間(jian)和緩(huan)沖(chong)間(jian)的門不(bu)(bu)(bu)(bu)應(ying)直對），操(cao)作(zuo)間(jian)和緩(huan)沖(chong)間(jian)之間(jian)應(ying)具備滅(mie)菌功能(neng)的樣品傳遞(di)箱。在緩(huan)沖(chong)間(jian)內應(ying)有(you)洗手盆(pen)、毛巾、無菌衣褲放(fang)置(zhi)架及掛鉤、拖(tuo)鞋等，不(bu)(bu)(bu)(bu)應(ying)放(fang)置(zhi)培養箱和其他雜物；無菌室內應(ying)六面(mian)光(guang)滑平整，能(neng)耐受清洗消(xiao)毒。墻壁(bi)與地面(mian)、天花板連(lian)接處應(ying)呈凹(ao)弧(hu)形，無縫隙，不(bu)(bu)(bu)(bu)留死(si)角。操(cao)作(zuo)間(jian)內不(bu)(bu)(bu)(bu)應(ying)安裝下水道。
無(wu)菌(jun)操(cao)作室應(ying)(ying)(ying)具有空氣(qi)除菌(jun)過濾的(de)單向流(liu)空氣(qi)裝(zhuang)置(zhi)，操(cao)作區潔凈(jing)度100級(ji)或放(fang)置(zhi)同等級(ji)別的(de)超凈(jing)工作臺，室內(nei)(nei)(nei)溫度控制18—26℃，相(xiang)對(dui)濕度45%—65%。緩沖間(jian)及(ji)操(cao)作室內(nei)(nei)(nei)均應(ying)(ying)(ying)設(she)置(zhi)能(neng)達(da)到空氣(qi)消(xiao)毒(du)(du)效果的(de)紫外(wai)(wai)燈或其他適宜的(de)消(xiao)毒(du)(du)裝(zhuang)置(zhi)，空氣(qi)潔凈(jing)級(ji)別不(bu)同的(de)相(xiang)鄰房間(jian)之間(jian)的(de)靜壓(ya)差應(ying)(ying)(ying)大于(yu)5Pa，無(wu)菌(jun)室（區）與(yu)室外(wai)(wai)大氣(qi)的(de)靜壓(ya)差大于(yu)10Pa。無(wu)菌(jun)室內(nei)(nei)(nei)的(de)照明燈應(ying)(ying)(ying)嵌(qian)裝(zhuang)在天花板內(nei)(nei)(nei)，室內(nei)(nei)(nei)光照應(ying)(ying)(ying)分布均勻，光照度不(bu)低于(yu)300lx。緩沖間(jian)和操(cao)作間(jian)所設(she)置(zhi)的(de)紫外(wai)(wai)線殺(sha)(sha)菌(jun)燈（2—2.5w/m3），應(ying)(ying)(ying)定期檢查輻(fu)射強度，要(yao)求在操(cao)作面(mian)上達(da)40uw/m2。不(bu)符(fu)合要(yao)求的(de)紫外(wai)(wai)殺(sha)(sha)菌(jun)燈應(ying)(ying)(ying)及(ji)時更(geng)換(huan)。
2.建(jian)立使(shi)(shi)用(yong)登(deng)記(ji)制度：藥廠各個微生(sheng)物檢測檢驗室都要建(jian)立使(shi)(shi)用(yong)登(deng)記(ji)制度。在登(deng)記(ji)冊中(zhong)可(ke)設置以下項目內容(rong)：如使(shi)(shi)用(yong)日期、時間、使(shi)(shi)用(yong)人(ren)、設備(bei)運行狀(zhuang)況、溫度、濕(shi)度、潔凈(jing)度狀(zhuang)態（沉(chen)降菌數、浮游(you)菌數、塵埃粒子(zi)數）、報修原因(yin)、報修結果、清潔工(gong)作（臺面(mian)、地面(mian)、墻(qiang)面(mian)、天花板(ban)、傳遞窗、門把手）、消毒液名(ming)稱等。
3.建(jian)立使用標準操(cao)作規(gui)范（SOP）并(bing)嚴格管理(li):SOP內容至少要有以下幾點：（1）規(gui)定凈化系(xi)統(tong)使運轉時間要求(qiu)每次(ci)實驗前應開(kai)啟凈化系(xi)統(tong)使運轉至少1h以上，同(tong)時開(kai)啟凈化臺(tai)和紫外(wai)燈。
（2）物(wu)品進入(ru)無菌(jun)室(shi)基本要求：凡進入(ru)無菌(jun)室(shi)的(de)物(wu)品必須先(xian)在(zai)緩沖(chong)(chong)間內對外(wai)部(bu)表面用(yong)消(xiao)毒劑消(xiao)毒滅菌(jun)，再(zai)經物(wu)流(liu)緩沖(chong)(chong)間、傳(chuan)遞窗1h以(yi)上，及無菌(jun)空(kong)氣吹(chui)干(gan)后送入(ru)無菌(jun)室(shi)。注意(yi)帶纖(xian)維、易(yi)發(fa)塵物(wu)品不得帶進凈化實驗(yan)室(shi)。無菌(jun)室(shi)內固定物(wu)品不得任(ren)意(yi)搬出(chu)。
（3）人(ren)員進(jin)入(ru)(ru)無(wu)(wu)菌(jun)(jun)室要求(qiu)：實(shi)驗人(ren)員進(jin)入(ru)(ru)無(wu)(wu)菌(jun)(jun)室不(bu)(bu)得化妝(zhuang)、帶(dai)手表、戒(jie)指等(deng)首飾；不(bu)(bu)得吃東(dong)西、嚼口(kou)香糖。應(ying)清(qing)潔手后(hou)(hou)進(jin)入(ru)(ru)緩沖間(jian)更衣，同時換(huan)(huan)上(shang)(shang)消(xiao)(xiao)毒(du)隔離(li)(li)拖鞋，脫去外衣，用消(xiao)(xiao)毒(du)液消(xiao)(xiao)毒(du)雙(shuang)手后(hou)(hou)戴上(shang)(shang)無(wu)(wu)菌(jun)(jun)手套，換(huan)(huan)上(shang)(shang)無(wu)(wu)菌(jun)(jun)連衣帽（不(bu)(bu)得讓頭發、衣等(deng)暴(bao)露(lu)在外面），戴上(shang)(shang)無(wu)(wu)菌(jun)(jun)口(kou)罩。然后(hou)(hou)，換(huan)(huan)或是(shi)再戴上(shang)(shang)第(di)二副(fu)無(wu)(wu)菌(jun)(jun)手套，在進(jin)入(ru)(ru)第(di)二緩沖間(jian)時換(huan)(huan)第(di)二雙(shuang)消(xiao)(xiao)毒(du)隔離(li)(li)拖鞋。再經風(feng)淋室30s風(feng)淋后(hou)(hou)進(jin)入(ru)(ru)無(wu)(wu)菌(jun)(jun)室。
（4）溫濕(shi)度(du)觀察要求(qiu)：觀察溫度(du)計(ji)、濕(shi)度(du)計(ji)上顯示的(de)溫濕(shi)度(du)是否(fou)在規定的(de)范圍內(nei)，并作為(wei)實(shi)驗原(yuan)始數(shu)據記錄(lu)(lu)在案。如發現問題(ti)應及時尋找原(yuan)因，及時報(bao)修和及時報(bao)告實(shi)驗室主管，并將報(bao)修原(yuan)因和結果記錄(lu)(lu)歸檔。
（5）沉降(jiang)菌(jun)(jun)落(luo)計(ji)數(shu)與浮游(you)菌(jun)(jun)測定要(yao)求：在(zai)(zai)(zai)每(mei)次(ci)(ci)實(shi)驗(yan)(yan)同時(shi)，對操(cao)作(zuo)室和層流臺做微(wei)生物沉降(jiang)菌(jun)(jun)落(luo)計(ji)數(shu)，將結果記(ji)錄(lu)在(zai)(zai)(zai)使(shi)用(yong)登(deng)記(ji)本上，并(bing)作(zuo)為(wei)實(shi)驗(yan)(yan)環境(jing)原始數(shu)據記(ji)錄(lu)在(zai)(zai)(zai)實(shi)驗(yan)(yan)報告上。每(mei)周1次(ci)(ci)，或在(zai)(zai)(zai)無菌(jun)(jun)檢查等必要(yao)時(shi)，在(zai)(zai)(zai)每(mei)次(ci)(ci)實(shi)驗(yan)(yan)同時(shi)對操(cao)作(zuo)室和凈化臺進行浮游(you)菌(jun)(jun)測定，將結果記(ji)錄(lu)在(zai)(zai)(zai)使(shi)用(yong)登(deng)記(ji)本上，并(bing)作(zuo)為(wei)實(shi)驗(yan)(yan)環境(jing)原始數(shu)據記(ji)錄(lu)在(zai)(zai)(zai)實(shi)驗(yan)(yan)報告上。
（6）消(xiao)毒(du)要求：無(wu)菌(jun)室每(mei)周(zhou)和每(mei)次操(cao)作(zuo)(zuo)(zuo)前(qian)用(yong)0.1%新潔(jie)(jie)(jie)爾滅(mie)或(huo)2%甲酚液(ye)或(huo)其他適(shi)宜消(xiao)毒(du)液(ye)（常用(yong)消(xiao)毒(du)劑(ji)(ji)的(de)(de)品(pin)種有(you)：5—20倍稀釋(shi)的(de)(de)碘(dian)伏水溶(rong)液(ye)、0.1%新潔(jie)(jie)(jie)爾滅(mie)溶(rong)液(ye)、1：50的(de)(de)84消(xiao)毒(du)液(ye)、75%乙醇(chun)溶(rong)液(ye)、3%碘(dian)酒溶(rong)液(ye)、5%石炭酸(suan)(suan)（來蘇兒）消(xiao)毒(du)溶(rong)液(ye)、2%戊二醛水溶(rong)液(ye)、尼泊(bo)金乙醇(chun)消(xiao)毒(du)液(ye)（處(chu)方：對(dui)羥基苯(ben)甲酸(suan)(suan)甲酯21.5g；對(dui)羥基苯(ben)甲酸(suan)(suan)丙酯8.6g，75%乙醇(chun)10ml）等(deng)，所(suo)用(yong)的(de)(de)消(xiao)毒(du)劑(ji)(ji)品(pin)種與使(shi)用(yong)要進行有(you)效性驗證方可使(shi)用(yong)，并(bing)定期(qi)更換消(xiao)毒(du)劑(ji)(ji)的(de)(de)品(pin)種）擦(ca)拭操(cao)作(zuo)(zuo)(zuo)臺(tai)及可能污染的(de)(de)死角，方法是用(yong)無(wu)菌(jun)紗布(bu)浸(jin)漬消(xiao)毒(du)溶(rong)液(ye)清(qing)潔(jie)(jie)(jie)超凈臺(tai)的(de)(de)整個內(nei)表面(mian)、頂面(mian)、及無(wu)菌(jun)室、人流(liu)、物流(liu)、緩沖間的(de)(de)地(di)板(ban)、傳(chuan)遞窗、門把手(shou)。清(qing)潔(jie)(jie)(jie)消(xiao)毒(du)程(cheng)序應從內(nei)向(xiang)外(wai)，從高潔(jie)(jie)(jie)凈區到低(di)潔(jie)(jie)(jie)凈區。逐步向(xiang)外(wai)退出潔(jie)(jie)(jie)凈區域。然后開啟無(wu)菌(jun)空氣過濾器(qi)及紫外(wai)燈殺(sha)(sha)菌(jun)1—2h，以殺(sha)(sha)滅(mie)存留微(wei)生(sheng)物。在(zai)每(mei)次操(cao)作(zuo)(zuo)(zuo)完畢(bi)，同樣用(yong)上述消(xiao)毒(du)溶(rong)液(ye)擦(ca)拭工作(zuo)(zuo)(zuo)臺(tai)面(mian)，除去室內(nei)濕(shi)氣，用(yong)紫外(wai)燈殺(sha)(sha)菌(jun)30min。
（7）其(qi)他要求(qiu)：如遇停電(dian)，應立即停止實驗，離開無(wu)菌室。關閉所(suo)有電(dian)閘。重新(xin)進入無(wu)菌室前至少開啟機房運轉1h以(yi)上。
4.潔凈(jing)度檢查的(de)要(yao)求與方(fang)法：無(wu)菌(jun)室在消毒處(chu)理后，無(wu)菌(jun)試驗前(qian)及操作過(guo)程中需檢查空氣中菌(jun)落數(shu)，以此來判斷無(wu)菌(jun)室是否達(da)到規定(ding)的(de)潔凈(jing)度，常有(you)沉(chen)降菌(jun)和浮(fu)游菌(jun)測定(ding)方(fang)法。
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