PCR實驗室建設基本要求

1、實驗室依據所使用的方法可分為試劑準備、標本制備、擴增、產物分析等三或四個區域。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室，有上述前(qian)面三個區(qu)域(yu)即(ji)可。各區(qu)域(yu)應完全(quan)獨立(li)分隔(ge)，不應有任何(he)的(de)空氣(qi)直通(tong)。

2、產物分析區(qu)或(huo)三個區(qu)域的最(zui)后一個區(qu)域（即擴增及產物分析區(qu)），空氣流(liu)(liu)向應由室外(wai)向室內，可通過在室內設置通風櫥、排(pai)風扇或(huo)其他排(pai)風系統(tong)達到空氣流(liu)(liu)由室外(wai)向室內流(liu)(liu)動的要求。

3、PCR實(shi)驗室各區域儀器設備(bei)配(pei)備(bei)通(tong)常如下(xia)：

試劑準(zhun)備(bei)區:?儀器設(she)備(bei)主要(yao)應有(you)加樣(yang)器、冰箱、天(tian)平、低速離(li)心機、混勻器、可移動紫外燈(deng)等。可使用超凈工作(zuo)(zuo)臺作(zuo)(zuo)為(wei)試劑配制操(cao)作(zuo)(zuo)臺面。

標(biao)本(ben)制備(bei)區：儀(yi)器設備(bei)主要應有(you)生物安全柜（最好為(wei)B2,?可(ke)避免提(ti)取(qu)核酸在柜內(nei)反復(fu)循環(huan)，造成標(biao)本(ben)間交叉“污(wu)染”，出(chu)現假陽性結果(guo)。此外還應配備(bei)加樣(yang)器、臺(tai)式高速離心(xin)機(ji)（冷凍及常溫）、臺(tai)式低速離心(xin)機(ji)、恒(heng)溫設備(bei)（水浴和(he)/或干浴儀(yi)）、冰箱、混勻(yun)器和(he)可(ke)移動紫(zi)外燈等(deng)。

擴增區：主要(yao)儀(yi)器(qi)就是(shi)核酸擴增熱(re)循(xun)環(huan)儀(yi)（PCR儀(yi)，實時熒光或(huo)普(pu)通的）。熱(re)循(xun)環(huan)儀(yi)的電源應專用，并(bing)配備一個穩(wen)壓電源或(huo)UPS，以防止(zhi)由于電壓的波(bo)動對(dui)擴增測(ce)定的影響。此(ci)外，根據工(gong)作需要(yao)，還可配備加樣器(qi)、超(chao)凈臺等。

產物分析區： 本區所使用的儀(yi)器設備可能有加樣器、電(dian)泳儀(yi)（槽）、電(dian)轉印儀(yi)、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測(ce)序儀(yi)、酶(mei)標儀(yi)和洗板機等。

4、在理想情況下，PCR實(shi)驗室(shi)試劑準(zhun)備、標本制備、擴增(zeng)三個區域(yu)可設(she)置(zhi)緩沖間。在緩沖間內(nei)，可設(she)置(zhi)正(zheng)壓，使室(shi)內(nei)空氣不流向室(shi)外(wai)，室(shi)外(wai)空氣不流向室(shi)內(nei)。