PCR實驗室又叫基因擴增實驗室、臨床PCR實驗室、分子生物實驗室等，華安實驗室專業為各生物制藥、醫學臨床、醫院檢驗科室行業提供專業嚴謹的實驗室整體解決方案，資深設計師提供實驗室設計規劃布局、實驗室建設、裝修方案(an)，包括(kuo)實(shi)驗(yan)(yan)室系(xi)統改造，實(shi)驗(yan)(yan)室上(shang)下(xia)(xia)水(shui)系(xi)統、實(shi)驗(yan)(yan)室配電及強弱電系(xi)統、實(shi)驗(yan)(yan)室環保系(xi)統等，下(xia)(xia)面講解下(xia)(xia)pcr實(shi)驗(yan)(yan)室建設注意事項(xiang)：
臨床基因擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域：試劑(ji)貯存和(he)準備區(qu)、標本(ben)制(zhi)備區(qu)、擴增(zeng)(zeng)反應(ying)混合物配制(zhi)和(he)擴增(zeng)(zeng)區(qu)、擴增(zeng)(zeng)產物分(fen)析區(qu)。為避免交叉污染(ran)，進入各個工(gong)作(zuo)區(qu)(qu)域必須(xu)嚴(yan)格遵(zun)循(xun)單一方(fang)向進行，即只能從試劑貯存和(he)準備區(qu)(qu)->標本制(zhi)備區(qu)(qu)->擴增反應混合物配(pei)制(zhi)和(he)擴增區(qu)(qu)->擴增產(chan)物分析區(qu)(qu)。
各實驗區之間的試劑及樣品傳(chuan)遞(di)應(ying)通過傳(chuan)遞(di)窗進(jin)行
一、實驗室功能分區
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要(yao)求，但(dan)是(shi)為避(bi)免各個實驗區域(yu)間交叉污染的可能性(xing)，宜采用全(quan)送全(quan)排的氣(qi)流組(zu)織形式。同時，要(yao)嚴格控制送、排風的比例(li)以保證各實驗區的壓(ya)力要(yao)求。
1、試劑貯存和準備區
該實(shi)驗(yan)區(qu)主(zhu)要進行(xing)的(de)操(cao)作(zuo)為貯(zhu)(zhu)存試劑的(de)制(zhi)備、試劑的(de)分裝和主(zhu)反應(ying)混合液的(de)制(zhi)備。試劑和用于標本(ben)制(zhi)作(zuo)的(de)材(cai)(cai)料(liao)應(ying)直接運(yun)送(song)至該區(qu)，不得經過其他區(qu)域。試劑原材(cai)(cai)料(liao)必須貯(zhu)(zhu)存在本(ben)區(qu)內，并在本(ben)區(qu)內制(zhi)備成所需(xu)的(de)貯(zhu)(zhu)存試劑，對與氣流壓(ya)力的(de)控制(zhi)，本(ben)區(qu)并沒有嚴格的(de)要求(qiu)。
2、標本制備區
該(gai)區域主要進(jin)行的(de)(de)(de)操作(zuo)為臨床(chuang)標(biao)本的(de)(de)(de)保(bao)存、核酸（RNA、DNA）提取(qu)、貯存 及其加入至擴增反應(ying)管和(he)測定RNA時cDNA的(de)(de)(de)合成(cheng)。
本(ben)區的(de)壓力(li)梯(ti)度要求為(wei)(wei)：相(xiang)對于鄰近區域(yu)為(wei)(wei)正壓，以避(bi)免從鄰近區進入(ru)本(ben)區的(de)氣溶膠污染。另外，由(you)于在(zai)加(jia)樣操作中可能會發生氣溶膠所致的(de)污染，所以應(ying)避(bi)免在(zai)本(ben)區內部不必要的(de)走動。
3、擴增反應混合物配制和擴增區
該區域主(zhu)要進(jin)(jin)行DNA或cDNA擴增(zeng)(zeng)。此外，已制(zhi)備(bei)的DNA模(mo)板和合成的cDNA（來自樣本制(zhi)備(bei)區）的加入和主(zhu)反(fan)(fan)應(ying)(ying)混(hun)合液(ye)（來自試劑貯存和制(zhi)備(bei)區）制(zhi)備(bei)成反(fan)(fan)應(ying)(ying)混(hun)合液(ye)等(deng)也可在(zai)本區內進(jin)(jin)行。在(zai)巢式(shi)(shi)PCR測定中，通(tong)常在(zai)第(di)一(yi)輪擴增(zeng)(zeng)后(hou)必須(xu)(xu)打開反(fan)(fan)應(ying)(ying)管，因此巢式(shi)(shi)擴增(zeng)(zeng)有較高的污染危險(xian)性，第(di)二次加樣必須(xu)(xu)在(zai)本區內進(jin)(jin)行。
本(ben)區(qu)的(de)(de)壓力(li)梯度要求(qiu)為：相對于鄰近區(qu)域為負壓，以避(bi)(bi)免氣溶膠(jiao)從本(ben)區(qu)漏(lou)出。為避(bi)(bi)免氣溶膠(jiao)所致的(de)(de)污染(ran)，應(ying)盡量減少在(zai)本(ben)區(qu)內(nei)的(de)(de)不必要的(de)(de)走(zou)動。個別(bie)操(cao)作(zuo)如加(jia)樣(yang)等應(ying)在(zai)超凈臺內(nei)進行。
4、擴增產物分析區
該區域主要進行的(de)操(cao)作為擴增片段的(de)測定(ding)。如(ru)使用(yong)全自動(dong)封閉(bi)分析(xi)儀(yi)器檢(jian)測，此區域可不(bu)設。
本區(qu)(qu)是(shi)最主要(yao)的(de)擴增(zeng)產物(wu)污染來源，因此對本區(qu)(qu)的(de)壓力梯度的(de)要(yao)求為(wei)：相(xiang)對于(yu)鄰近區(qu)(qu)域(yu)為(wei)負壓，以避免擴增(zeng)產物(wu)從本區(qu)(qu)擴散(san)至其他區(qu)(qu)域(yu)。
二、實驗室污染的預防與控制
PCR實(shi)驗室設(she)計的(de)(de)(de)核心問(wen)題是(shi)如何避免污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)。在(zai)實(shi)際工作中(zhong)，常見的(de)(de)(de)有以下幾種污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)類型(xing)：擴增產物的(de)(de)(de)污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)；天然基因(yin)組DNA的(de)(de)(de)污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)；試(shi)劑的(de)(de)(de)污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)以及標本間的(de)(de)(de)污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)。由于一旦發生(sheng)污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)，實(shi)驗就必須停止，直到(dao)找到(dao)污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)源(yuan)為止，而(er)且實(shi)驗結果必須作廢，需(xu)重新進行實(shi)驗。所以發生(sheng)污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)后再圍繞實(shi)驗室來尋找污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)源(yuan)不但耗時而(er)且繁瑣，浪費人力物力。因(yin)此要避免污(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)(ran)，首先應是(shi)預(yu)防，而(er)不是(shi)排除。
1、工作區域的嚴格劃分
（1）各個實驗區域設置合理；
（2）各個(ge)實驗區域要有明(ming)顯的標(biao)記（如醒目的門牌(pai)或不(bu)同的地面顏(yan)色等），以避免各個(ge)不(bu)同實驗區域設備物(wu)品、試劑等發(fa)生混淆。
2、合理的系統設置
（1）合理的空調通風系統設置，盡量采用全送全排的空調系統；
（2）嚴格的(de)氣流壓力控制，保證不同的(de)實驗區內(nei)不同的(de)壓力要(yao)求(qiu)。
3、規范的操作
（1）臨床基因擴增檢驗實驗室的技術人員必須進行上崗培訓，經培訓合格后才能從事臨床基因擴增檢驗的工作；
（2）在實驗操作過程中，操作者必須戴手套，并經常更換。此外，操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施；
（3）清潔工(gong)作及(ji)時、正(zheng)確。實(shi)驗工(gong)作結束后，必須立即(ji)對本區進行清潔。除常規的消(xiao)毒(du)液體對表面(mian)進行擦拭消(xiao)毒(du)或紫外(wai)(wai)線(xian)燈(deng)的照(zhao)射(she)消(xiao)毒(du)外(wai)(wai)，對一些實(shi)驗設備還應(ying)進行高壓消(xiao)毒(du)處理。
4、嚴格的管理
（1）嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室，有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區的門；
（2）在各個實驗區域使用帶有明顯區別標志的工作服（如不同顏色），當工作人員離開時不得將本區的工作服帶至其它區域；
（3）盡量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉污染的可能性。
（4）擴增產物分析區是最主要的擴增產物污染來源，廢液不能在實驗室中傾倒，必須經消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉，用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒后統一處理，如焚燒等；
（5）擴增產(chan)物分析區可能會用(yong)到某(mou)些(xie)可致(zhi)基因突變(bian)和有毒物質，應特別注(zhu)意(yi)實驗人員的安(an)全防(fang)護。
5、完備的實驗室配套設施
完備(bei)的實驗(yan)室配套(tao)設(she)施是保(bao)證實驗(yan)工作的必要條(tiao)件，應根據各個實驗(yan)室實驗(yan)內容的不同配備(bei)相應的設(she)備(bei)和儀器，如超凈(jing)工作臺、離心機(ji)、加樣器等(deng)。
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