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標準PCR實驗室各區域應如何布局?

實驗室是進行科學實驗的場所,實驗室是科學的搖籃,科技發展的源泉,對科技發展起著非常重要的作用。PCR實驗室原則上(shang)分(fen)為試(shi)劑準備區(qu)(qu)、樣品(pin)制備區(qu)(qu)、擴(kuo)增(zeng)區(qu)(qu)和擴(kuo)增(zeng)產物分(fen)析區(qu)(qu)四(si)個單獨(du)的工(gong)作區(qu)(qu)域,并(bing)設有專用走廊(lang)。各(ge)工(gong)作區(qu)(qu)域應設緩沖間,工(gong)作區(qu)(qu)與緩沖間宜安裝(zhuang)連(lian)鎖裝(zhuang)置。同功能的工(gong)作區(qu)(qu)應是分(fen)隔獨(du)立的,各(ge)工(gong)作區(qu)(qu)有明顯的標志,不能直通,如果緊密(mi)連(lian)接,安裝(zhuang)物品(pin)傳(chuan)遞(di)窗。

1、標準的PCR實驗室試劑準備區:

儀器(qi)設備主要應有加樣器(qi)、冰箱、天(tian)秤、低(di)速離心機(ji)、混(hun)勻器(qi)、可(ke)移動紫(zi)外燈等。每類生物(wu)(wu)安全防護實(shi)驗(yan)(yan)室根據所(suo)處理的(de)(de)微(wei)生物(wu)(wu)及其毒素(su)的(de)(de)危害程(cheng)度各分(fen)為(wei)四級(ji)。各級(ji)實(shi)驗(yan)(yan)室的(de)(de)生物(wu)(wu)安全防護要求(qiu)依(yi)次為(wei):一級(ji)最低(di) ,四級(ji)最高。實(shi)驗(yan)(yan)室按(an)歸(gui)屬(shu)(shu)(shu)可(ke)分(fen)為(wei)三類:第一類是從屬(shu)(shu)(shu)于大(da)學或者是由大(da)學代管的(de)(de)實(shi)驗(yan)(yan)室。第二類實(shi)驗(yan)(yan)室屬(shu)(shu)(shu)于國家機(ji)構,有的(de)(de)甚至是國際機(ji)構。第三類實(shi)驗(yan)(yan)室直(zhi)接歸(gui)屬(shu)(shu)(shu)于工業企業部門,為(wei)工業技術的(de)(de)開發與研究(jiu)服務。可(ke)使(shi)用超凈(jing)工作臺(tai)作為(wei)試劑配制操作臺(tai)面。

2、標準的PCR實驗室標本制備區:

儀(yi)器(qi)設備(bei)主要應(ying)(ying)有(you)生物(wu)安全柜(最好(hao)為(wei)B2,可避免(mian)提取(qu)核(he)酸在柜內反復循環造(zao)成標本間叉“污染”, 出現假陽性結果)。此(ci)外還應(ying)(ying)配備(bei)加樣(yang)器(qi)、臺式高速(su)離心機(冷(leng)凍及常溫)、臺式低(di)速(su)離心機、恒溫設備(bei)(水浴和(he)(he)/或(huo)干浴儀(yi))、冰箱、混溝(gou)器(qi)和(he)(he)可移(yi)動紫外燈(deng)等。

3、標準的PCR實驗室擴增區:

主要儀器就是核酸擴(kuo)增熱循(xun)環儀( PCR儀,實時熒(ying)光或普通的(de)(de))。熱循(xun)環儀的(de)(de)電源應專(zhuan)用,并配(pei)備(bei)一個穩壓(ya)(ya)電源 ,以(yi)防止由(you)于電壓(ya)(ya)的(de)(de)波動對擴(kuo)增測定(ding)的(de)(de)影響。此外,根據(ju)工作需要,還(huan)可配(pei)備(bei)加樣器、超凈(jing)臺(tai)等。

4、標準的PCR實驗室產物分析區:

本區所使用(yong)的儀器(qi)設備可(ke)能(neng)有加樣器(qi)、電泳儀(槽)、電轉印儀、雜交(jiao)爐或雜交(jiao)箱(xiang)、水浴箱(xiang)、DNA測(ce)序儀、酶(Enzyme)標(biao)儀和洗板機等。

在(zai)理想情(qing)況下(xia), PCR實驗室試劑準(zhun)備、標本制備、擴增三個(ge)區域(yu)可設置緩沖間。在(zai)緩沖間內(nei),可設置正(zheng)壓,使(shi)室內(nei)空氣不流向外,外空氣不流向室內(nei)。

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