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PCR實驗室各分區實驗室設備配置要求

PCR實(shi)驗室依據所使用的方法可(ke)分為(wei)試劑準備、標本制備、擴(kuo)增(zeng)、產物(wu)分析等(deng)三或四個區域(yu)。只是使用實(shi)時熒光PCR儀、HIV病毒載量測(ce)定儀的PCR實(shi)驗室,有上述前(qian)面三個區域(yu)即可(ke)。各(ge)區域(yu)應完(wan)全獨立分隔,不應有任何(he)的空氣直通。

PCR實驗室各分區實驗室設備配置要求

產物(wu)(wu)分(fen)析區或三個區域(yu)的最后一個區域(yu)(即擴增及產物(wu)(wu)分(fen)析區),空氣(qi)流(liu)向應由室外(wai)向室內(nei),可通過在(zai)室內(nei)設置通風櫥、排風扇或其他排風系統達到空氣(qi)流(liu)由室外(wai)向室內(nei)流(liu)動(dong)的要求。

PCR實驗室各區域實驗室設備配備通常如下:

1、試劑準備區:

儀(yi)器設備主要(yao)應有加樣器、冰箱、天平、低速離心機、混勻器、可移動紫外燈(deng)等(deng)。可使(shi)用超凈工作(zuo)臺作(zuo)為(wei)試劑配制操作(zuo)臺面(mian)。

2、標本制備區

儀器(qi)設(she)備主(zhu)要應(ying)有生物安全柜(ju)(最(zui)好為B2, 可避(bi)免提取核酸在柜(ju)內反(fan)復循環,造(zao)成標本間交叉“污(wu)染”,出現假陽性(xing)結果。此外(wai)還應(ying)配備加(jia)樣(yang)器(qi)、臺(tai)式高速離(li)心(xin)機(ji)(冷凍及常溫(wen)(wen))、臺(tai)式低速離(li)心(xin)機(ji)、恒溫(wen)(wen)設(she)備(水浴和(he)/或干浴儀)、冰箱、混勻器(qi)和(he)可移動紫外(wai)燈等。

3、擴增區

主(zhu)要(yao)儀器就(jiu)是(shi)核酸擴(kuo)增(zeng)熱循環儀(PCR儀,實(shi)時熒光(guang)或普通的)。熱循環儀的電源(yuan)應專用(yong),并配(pei)備一(yi)個(ge)穩壓(ya)電源(yuan)或UPS,以防止由于電壓(ya)的波動對擴(kuo)增(zeng)測(ce)定的影(ying)響。此外(wai),根據工作需要(yao),還可配(pei)備加(jia)樣器、超凈臺等。

4、產物分析區:

本區(qu)所(suo)使用的儀器(qi)設備可能有加(jia)樣器(qi)、電泳(yong)儀(槽)、電轉(zhuan)印儀、雜(za)交(jiao)爐或雜(za)交(jiao)箱(xiang)、水浴(yu)箱(xiang)、DNA測(ce)序儀、酶標儀和洗板機等。

在理想(xiang)情(qing)況下,PCR實驗(yan)室(shi)試劑準備、標(biao)本制備、擴(kuo)增三(san)個區(qu)域可設(she)(she)置緩(huan)沖(chong)間。在緩(huan)沖(chong)間內,可設(she)(she)置正壓,使室(shi)內空氣不流向(xiang)室(shi)外,室(shi)外空氣不流向(xiang)室(shi)內。

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